制备液相色谱仪的定义及简述

制备液相色谱仪的定义及简述

制备液相色谱仪是一种由储液瓶、高压泵、进样系统、色谱柱、检测器、废液瓶六部分组成的仪器。

输液泵是HPLC系统中zui重要的部件之一。泵的性能好坏直接影响到整个系统的质量和分析结果的可靠性。输液泵应具备如下性能：①流量稳定，其RSD应＜0.5%，这对定性定量的正确性至关重要；②流量范围宽，分析型应在0.1~10 ml/min范围内连续可调，制备型应能达到100 ml/min；③输出压力高，一般应能达到150~300 kg/cm2；④液缸容积小；⑤密封性能好，耐腐蚀。

    泵的种类很多，按输液性质可分为恒压泵和恒流泵。恒流泵按结构又可分为螺旋注射泵、柱塞往复泵和隔膜往复泵。恒压泵受柱阻影响，流量不稳定；螺旋泵缸体太大，这两种泵已被淘汰。目前应用zui多的是柱塞往复泵。

    柱塞往复泵的液缸容积小，可至0.1ml，因此易于清洗和更换活动相，特别适合于再循环和梯度洗脱；改变电机转速能方便地调节流量，流量不受柱阻影响；泵压可达400 kg/cm2。其主要缺点是输出的脉冲性较大，现多采用双泵系统来克服。双泵按连接方式可分为并联式和串联式，一般说来并联泵的流量重现性较好（RSD为0.1%左右，串联泵为0.2~0.3%），但出故障的机会较多（因多一单向阀），价格也较贵。

    早期使用隔膜和停流进样器，装在色谱柱进口处。现在大都使用六通进样阀或自动进样器。进样装置要求：密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。HPLC进样方式可分为：隔膜进样、停流进样、阀进样、自动进样。

    1．隔膜进样。用微量注射器将样品注进专门设计的与色谱柱相连的进样头内，可把样品直接送到柱头填充床的中心，死体积几乎即是零，可以获得*的柱效，且价格便宜，操纵方便。但不能在高压下使用（如10MPa以上）；此外隔膜轻易吸附样品产生记忆效应，使进样重复性只能达到1~2%；加之能耐各种溶剂的橡皮不易找到，常规分析使用受到限制。

    2．停流进样。可避免在高压下进样。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新启动时往往会出现“鬼峰”；另一缺点是保存时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中，效果较好。

    3．阀进样。一般HPLC分析常用六通进样阀（以美国Rheodyne公司的7725和7725i型zui常见），其关键部件由圆形密封垫（转子）和固定底座（定子）组成。由于阀接头和连接管死体积的存在，柱效率低于隔膜进样（约下降5~10%左右），但耐高压（35~40MPa），进样量正确，重复性好（0.5%），操纵方便。

    4．自动进样。用于大量样品的常规分析。