色谱柱的平衡及组成

色谱柱的平衡及组成

色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成，压力不高于70 kg/cm2 时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效，减小管壁效应，不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度，其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的，用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板，是烧结不锈钢或钛合金，孔径0.2~20μm(5~10&μm)，取决于填料粒度，目的是防止填料漏出。

色谱柱是由柱管和固定相组成，按照拄管的粗细和固定相的填充方式分为（1）填充柱；（2）毛细管柱。

色谱柱的平衡

反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇（或乙腈）/水中的。请一定确保您所使用的活动相和甲醇（或乙腈）/水互溶，由于色谱柱在运输过程中可能会干掉，因此在用活动相分析样品之前，应使用分10-20倍的体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。

    假如您所使用的活动相中含有缓冲盐，应留意用含水量很高（约95%）的活动相过渡，样品分析完后，冲洗柱子是亦然。过往传统的方法使用纯水冲洗，对于非极性柱，如C8或C18，由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链，造成柱效下降。

    另外，分析样品时，由于纯水在填料表面不能浸润形成水膜，出现样品不保存而分不开，重现性差，所以对于一般的C18或C8，有机溶剂不能低于5%。硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。假如该色谱柱需要使用含水或甲醇或乙腈的活动相，请在使用活动相之前用乙醇或异丙醇平衡。

    色谱柱在平衡过程中，将流速缓慢地进步用活动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂浓度假如较低，则需要较长的时间平衡）。