液相色谱仪相关知识之塔板理论

一、塔板理论的基本假设  
       塔板理论是Martin和Synger首先提出的色谱热力学平衡理论。它把色谱柱看作分馏塔，把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程，即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。塔板理论的基本假设为： 
1）色谱柱内存在许多塔板，组分在塔板间隔（即塔板高度）内*服从分配定律，并很快达到分配平衡。 
2）样品加在第0号塔板上，样品沿色谱柱轴方向的扩散可以忽略。 
3）流动相在色谱柱内间歇式流动，每次进入一个塔板体积。 
4）在所有塔板上分配系数相等，与组分的量无关。 
   虽然以上假设与实际色谱过程不符，如色谱过程是一个动态过程，很难达到分配平衡；组分沿色谱柱轴方向的扩散是不可避免的。但是塔板理论导出了色谱流出曲线方程，成功地解释了流出曲线的形状、浓度极大点的位置，能够评价色谱柱柱效。 

二、色谱流出曲线方程及定量参数（峰高h和峰面积A） 
       根据塔板理论，流出曲线可用下述正态分布方程来描述； 
C=e或C=e 
由色谱流出曲线方程可知；当t=tR时，浓度C有极大值，Cmax=.Cmax就是色谱峰的峰高。
因此上式说明；①当实验条件一定时（即σ一定），峰高h与组分的量C0（进样量）成正比，所以正常峰的峰高可用于定量分析。 
②当进样量一定时，σ越小（柱效越高），峰高越高，因此提高柱效能提高HPLC分析的灵敏度。 
由曲线方程对V（0～∞）求积分，即得出色谱峰面积A＝×σ×Cmax=C0。可见A相当于组分进样量C0，因此是常用的定量参数。把Cmax=h和Wh/2＝2.355σ代入上式，即得A＝1.064×Wh/2×h，此为正常峰的峰面积计算公式。


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