阴离子交换色谱柱通常在高压下运行
更新时间:2020-04-06 点击次数:1763
阴离子交换色谱柱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团,这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。
阴离子交换色谱柱键合固定相是以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质,通过使用高纯度键合试剂在硅胶上键合季铵强阴离子交换基团,具有季铵和苯基官能团的混合化学结构。这种强阴离子交换相与疏水相的混合模式可以为各种有机化合物如芳香族或脂肪族羧酸和磺酸等提供高效和高选择性的分离。
阴离子交换色谱柱基本原理:
离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法,其原理是指被分离物质所带的电荷可与离子交换剂所带的相反电荷结合,这种带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的,在改变pH或者用逐渐增加离子强度的缓冲液洗脱时,离子交换剂上结合的物质可与洗脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质的电荷不同,其与离子交换剂的结合能力也不同,所以被洗脱到溶液中的顺序也不同,从而被分离出来。
阴离子交换色谱柱通常在高压下运行。如果管路连接不紧,将会导致有机溶剂和注入样品的泄漏,从而对操作人员的健康产生影响。一旦发生泄漏,应佩戴适当的手套进行处理。另外当打开色谱柱时还应采取适当的保护措施,以防止微小的硅胶颗粒进入呼吸道。