液相色谱仪在使用中常见问题及解决方法

液相色谱仪在使用中常见问题及解决方法

液相色谱仪作为一种高精密仪器，如果在使用过程中操作不当的话,就容易导致一些问题，其中常见的就是柱压问题、漂移问题。

柱压问题

柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值，而是指压力波动范围在345kPa以内（在使用梯度洗脱时，柱压平稳、缓慢的变化是允许的）。压力过高、过低都属于柱压问题。

压力过高

这是液相色谱仪在使用中常见的问题，指的是压力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的情况。此时，我们应该分段进行检查。

①首先断开真空泵的入口处，此时EK管里充满液体，使EK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。处理方法：用30%的硝酸浸泡0.5h，在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，再检查。

②打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，则是过滤头堵塞。处理方法：将过滤头取出，用10%的异丙醇超声30min。如果压力降至690kPa以下，过滤头正常，再检查。

③把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常；如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不慎，很容易造成柱效下降，所以尽量少用。 

压力过低

压力过低的现象一般是由于系统泄漏，处理方法：寻找各个接口处，特别是色谱柱两端的接口，把泄漏的地方旋紧即可。当然还有一个原因就是泵里进了空气，但此时表现的往往是压力不稳，忽高忽低，更严重一点会导致泵无法吸进液体。处理方法：打开Purge阀，用3~5ml/min的流速冲洗，如果不行，则要用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。