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酶是应该保存在-20℃还是-80℃？

更新时间：2025-03-11 点击次数：203

酶是一种蛋白质，而蛋白质的稳定性会受多种因素的影响，如pH，离子浓度，保护剂等等。其中温度是影响蛋白质稳定性最主要的因素之一，通常情况下低温保存应该可以减缓酶的降解过程。那么对于酶的保存，是选择-20℃还是-80℃呢？

我记得实验室里通常用的冰箱温度是-20℃，而超低温冰箱是-80℃。可能不同的酶有不同的要求。比如有些酶可能对温度更敏感，需要更低的温度来保持活性。不过为什么会有这样的差异呢？

1，酶的结构。高温会导致蛋白质变性，但低温下是否也会有影响？冷冻过程中，水分会形成冰晶，冰晶的大小和数量可能影响酶的结构。-80℃下，冰晶形成较小，对酶结构的破坏可能更少，而-20℃可能形成较大的冰晶，导致酶结构受损。这可能是为什么有些酶需要-80℃保存的原因之一。另外，反复冻融可能破坏结构，所以保存温度的选择不仅要看温度，还要看是否经常需要取用。

2，保存时间。如果需要长期保存，比如几个月甚至几年，-80℃可能更合适，因为更低的温度可以进一步减慢酶的降解速度。而短期保存可能用-20℃就足够了。

3，酶的形式也可能影响保存条件。比如液体状态和冻干粉状态。冻干粉可能在-20℃下更稳定，而液体酶可能需要更低的温度，尤其是如果含有容易分解的成分的话。甘油常用来防止冰晶形成，可能在 - 20℃下就能有效保护酶，而如果没有甘油，可能需要更低的温度。有些酶可能需要特定的缓冲液或保护剂来维持结构稳定，这时候保存温度的选择也会不同。

4，成本问题。-80℃的冰箱更贵，运行成本更高，耗电更多。所以如果不需要长期保存或者酶的稳定性足够好，可能实验室会选择-20℃来节省成本。这也可能是一些常用酶保存在-20℃的原因。

5，运输过程中的温度。有些酶在运输时可能用干冰，也就是-78℃左右，接近-80℃，所以如果长期保存在-80℃，可能更符合运输条件，减少温度波动带来的影响。而如果实验室收到酶后转移到-20℃，可能会有温度变化，导致酶活性的损失。

6，不同类型的酶可能有不同的要求。比如Taq酶用于PCR，通常保存在-20℃，而某些更敏感的酶比如逆转录酶或者连接酶可能需要-80℃。可能生产商的推荐也很重要，不同厂商可能有不同的建议，基于他们的稳定性测试结果。

7，酶自身的稳定性。有些酶在-20℃下可能容易发生自降解或受到蛋白酶污染，而-80℃可以几乎玩全停止这些过程。特别是如果酶溶液中存在微量的蛋白酶，低温可以抑制其活性，从而保护目标酶。有些酶可能在低温下更容易聚集或沉淀，这时候可能需要特定的保存条件。或者，某些酶可能对温度变化更敏感，需要更严格的控制。

8，反复冻融的问题。如果酶需要频繁使用，保存在-20℃可能更方便，因为每次取出后可能在-20℃下只是部分冻结，而-80℃的酶可能需要更长时间解冻，或者反复冻融的次数多了会影响稳定性。这时候分装保存可能更重要，不管是-20还是-80，分装成小份可以减少反复冻融的影响。

9，添加剂的影响。比如有些酶保存液中含有甘油，使其在-20℃不冻结，这样酶处于液态但低温，可能更稳定。而如果保存在-80℃，甘油浓度可能需要调整，否则会冻结，反而可能影响稳定性。或者有些保存液中添加了稳定剂，如BSA、DTT等，这些成分在不同温度下的稳定性也可能影响保存条件的选择。

10，微生物污染的可能性。更低的温度可能更有效地抑制微生物的生长，虽然-20℃已经很低，但某些耐低温的微生物可能仍有活动，而-80℃几乎可以玩全抑制。不过这种情况可能比较少见，因为酶通常是在无菌条件下保存的，但也不能玩全排除污染的可能性。

总的来说，需要综合考虑多种因素来决定酶的最佳保存温度，这些因素包括：酶的类型和稳定性、保存时间的长短、是否频繁使用、保存形式（液体或冻干粉）、添加剂的存在、成本考虑、生产商的建议以及防止反复冻融的措施。

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